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常见临床标本的微生物学检验（第2页）

（9）血压降低。

（10）呼吸加快。

（II）肝脾肿大：常见于革兰阴性杆菌败血症的原发病灶在肝胆系统的患者。

（12）关节疼痛。

（13）老年菌血症患者可能不发热或不低体温，如伴有身体不适、肌痛或卒中，可能是感染性心内膜炎的重要指征。

IO-局部感染：

（1）如脑膜炎、心内膜炎、肺炎、肾盂肾炎、腹腔内脓肿及烧伤等。

（2）血液病：如白血病、再生障碍性贫血、粒细胞缺乏症等，以及恶性肿瘤，尤其是淋巴瘤及多发性骨髓瘤。

（3）长期输液和介入性治疗患者。

（4）血液透析患者。

（5）重症监护室（ICU）的患者。

（6）获得性免疫缺陷综合征（艾滋病）患者。

1．防止皮肤寄生菌或环境微生物引起的污染是血培养的关键问题。即使在理想的消毒条件下，仍有3%~5%血培养中混有污染菌，它们来源于皮肤（表皮葡萄球菌、痤疮丙酸杆菌、梭杆菌属、类白喉杆菌）或环境（革兰阳性芽孢杆菌、不动杆菌属）。这些微生物有时能致病。对于两次不同部位血培养生长同一种微生物，微生物快速生长（

2．留取血培养标本时，为防止皮肤寄生菌污染，可使用消毒剂（碘酊或碘伏）对皮肤进行严格仔细的消毒处理，最大限度地降低皮肤污染。皮肤消毒严格按以下三步法进行：170%乙醇擦拭静脉穿刺部位待30s以上。2用一根碘酊或碘伏棉签消毒皮肤，1%~2%碘酊作用30s或10%碘伏作用60s，从穿刺点向外以1.5~2cm直径画圈进行消毒。370%乙醇脱碘（碘仿“iodophon”不用酒精脱）。严格执行三步消毒后，可行静脉穿刺采血。注意：对碘过敏的患者只能用70%乙醇消毒，消毒60s，待穿刺部位乙醇挥发干燥后穿刺采血。最后，将注射器针头在乙醇灯火焰上烧灼后再注入培养瓶中或更换注射器针头后再注入培养瓶中。

3．采血数量和时间大多数学者主张，24小时内血培养3次以上，阳性结果并没有明显增加。在已确诊的败血症病例中，从3次血培养中发现微生物的累积率为99%或更高。在体温升高时进行血培养是理想的，因为这个时间血循环中微生物的浓度最高，由于体温升高通常不能预知，一般推荐常规血培养至少应间隔1小时，从不同静脉穿刺位置获得血标本。正常情况下的防御机制从血循环中清除细菌大约需要30min的，因此，至少间隔1h的连续静脉穿刺所获得的阳性血培养结果证明是真正的败血症，而不是菌血症。

4．采血时间关系到血培养的成功与否。对间歇性寒战，应该估计寒战或体温高峰时间，在其到来之前采血，因为细菌进入血流与寒战发作通常间隔th，由于细菌很快会从血流中清除，发热时血液中可能已没有细菌。但实际上，血培养通常在寒战或发热后进行，这也是某些临床实验室血培养阳性率低的原因之一。当预测寒战或高热时间存在困难时，应在寒战或发热时尽快抽血培养。另外，采集血培养都应该在使用抗生素之前进行，用过抗生素治疗可能导致血培养结果阴性，微生物延迟生长更为常见。目前很多种血培养瓶中加入了树脂或活性炭等以吸附血液中的抗生素，也仅是部分解决了这一问题。对已应用抗生素且病情不允许停药的患者也应在下一次用药之前采血。

5．采血量每个培养瓶抽取的血量是10～20mL．送检时要注意保温（25—37℃），切忌冷冻保存。

1．革兰阳性菌：金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌、B群链球菌、A群链球菌、肠球菌、结核分枝杆菌、产单核李斯特菌、阴道加德纳菌。

2．革兰阴性菌：脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布兰汉菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、克雷伯杆菌、肠杆菌、变形杆菌、沙雷菌、沙门菌、不动杆菌、嗜肺军团菌、嗜血杆菌。

3．厌氧菌：类杆菌、产气荚膜梭菌。

4．病毒：乙型脑炎病毒、柯萨奇病毒A、柯萨奇病毒B、脊髓灰质炎病毒、新肠道病毒68~71型、狂犬病毒。

5．真菌及其他：念珠菌、曲霉菌、隐球菌、球孢子菌。

尿液（urine）

正常人尿液无菌。

1．泌尿道感染包括尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎和无症状的菌尿症等。泌尿系统感染的发病率高，彻底治愈率低。上尿路感染主要是肾盂肾炎，下尿路感染主要为尿道炎和膀胱炎，上、下尿路感染往往并存，发生在任何部位的感染灶如不能早期发现和及时治疗，病变迟早都会侵犯整个系统，一部分病例反复发作能引起肾脏进行性损害，甚至发生尿毒症或肾性高血压，因此对泌尿系统感染必须予以足够的重视。

2．单有细菌侵入泌尿系统不一定引起感染，常同时伴有其他危险因素，如先天性泌尿系畸形、尿路梗阻、代谢性疾病、尿路的器械检查、输尿管逆流、尿路结石等。

3．泌尿道感染常见病原菌：60%~80%为革兰阴性杆菌，其中以大肠埃希菌最为常见，占70%以上，其次为变形杆菌、铜绿假单胞菌、克雷伯菌、肠杆菌、沙雷菌、产气肠杆菌、沙门菌等。20%为革兰阳性菌，其中以肠球菌多见，其次为葡萄球菌、链球菌、结核分枝杆菌，少数为厌氧菌等。支原体、衣原体、真菌感染呈上升趋势。

4．钩端螺旋体引起的钩端螺旋体病能造成多器官广泛损伤，其主要累及肾小管，严重者可有急性肾小管坏死。在发病后第2周起至恢复后一段时间内，尿中钩体检出阳性率较高。引起非淋菌性尿道炎（NGU）的主要病原体是解尿脲原体（Uu）、人型支原体（Mh）和生殖道支原体（Mg）。引起尿路感染的病毒常为单纯疱疹病毒和巨细胞病毒。溶血性尿毒症综合征（HUS）的病原体可为多种病毒，最常见的是肠道病毒属中的柯萨奇病毒和埃可病毒，其他病毒有流感病毒、鼻病毒、腮腺炎病毒、EB病毒等。

5．正常人尿液是无菌的。但尿道口正常情况下存在多种细菌，主要是凝固酶阴性葡萄球菌，其次是肠球菌、类白喉棒状杆菌、枯草芽孢杆菌、微球菌、大肠埃希菌、变形杆菌、卡他布兰汉菌等，采用非侵入手段采集尿标本时易被污染。同时，这些细菌又是尿路感染中常见的病原菌。因此，一方面，尿液标本的采集必须严格无菌操作；另一方面，定量培养、菌落计数是必要的，以便将共生菌与潜在的病原菌区分开。

（1）每毫升尿液细菌数少于10^4时可能没有尿路感染，但如果尿液是通过膀胱穿刺直接来源于膀胱，每毫升细菌数少于10^4时也有临床意义；（2）若每毫升尿液中细菌数目为10^4~10^5且患者没有症状，则应重复检测1次，如果2次定量培养结果相同，则有临床意义；（3）若每毫升尿液中细菌数目为10^4~10^5，患者有尿路感染症状，尿液中只存在1种或2种细菌，则有临床意义；（4）若每毫升尿液细菌数多于10^5，且只存在1种或2种细菌，则有临床意义，包括无症状的女性患者。

（5）有3种以上细菌生长时应考虑污染，重新留取标本。

临床标本采集、处理的注意事项

1．下列情况可影响定量培养的结果，需要临床医生、护理人员综合考虑：

（1）在应用了对病原菌低敏感性的抗菌药物、高尿酸浓度、高渗透压、尿液pH失常（pH在5.0以下或8.5以上）等情况时，虽有感染存在，但尿液能抑制细菌繁殖，使细菌数减少；（2）患者因大量饮水、大量输液或应用利尿剂，而使尿液被过度稀释；尿频时，膀胱内细菌停留时间短则细菌数少。

2．任何方法采集尿液都应严格遵守在用药前进行，因为治疗中所用药物或其分解产物，绝大多数是通过尿液排泄，容易造成假阴性结果。

3．一定要严格无菌操作，必要时导尿或膀胱穿刺留尿标本，也可在无菌操作下取尿道脓液或分泌物标本。

4．通常收集晨起第一次尿液的清洁中段尿立即送检，不能立即送检的应冷藏保存，否则尿中病原菌可在室温中增殖而影响细菌计数的正确性。但用于病毒分离培养的尿标本不能经低温保存，必须新鲜接种培养。

5．尿液标本中不得加防腐剂及消毒剂，否则会影响检出的阳性率。

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